Kitabı oxu: «Вирулицидная эффективность дезинфицирующих средств. Сравнительный анализ», səhifə 2
Несмотря на то, что количество групп действующих веществ, применяемых для создания дезинфицирующего средства, относительно ограничено, зарегистрировано большое число готовых форм с заявленной вирулицидной активностью.
Однако в инструкциях по применению дезинфицирующих средств содержатся противоречивые сведения как об их вирулицидности, так и о диапазонах режимов применения.
В связи с этим было проведено настоящее исследование, целью которого явилось изучение сравнительной вирулицидной эффективности дезинфицирующих средств на основе катионных поверхностно-активных соединений (ЧАС, аминов, гуанидинов), комбинированных препаратов (включая альдегиды), веществ, содержащих фенольный компонент, а также спиртов в отношении безоболочечных (полиовирус, аденовирус) и оболочечных (вирус иммунодефицита человека, вирус гепатита С, вирус простого герпеса, вирусы гриппа А) вирусов.
2. Материалы и методы
Исследования проводили в соответствии с МУ 3.5.2431–08 «Методические указания по изучению и оценке вирулицидной активности дезинфицирующих средств» [3] и руководством Р 4.2.2643–10 «Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности» [4] в рамках испытаний дезинфекционных средств перед дезинфектологической экспертизой в целях государственной регистрации (Аттестат аккредитации № RA.RU.21ВИ01 от 23.10.2015 г.), а также с учетом европейских рекомендаций [5].
В настоящей работе представлены результаты испытания вирулицидной эффективности наиболее распространенных действующих веществ.
Тест-вирусы, использованные в испытаниях: вирус полиомиелита, аденовирус, ВИЧ, вирус гепатита С, вирус гриппа А (H1N1).
Вирус полиомиелита, тип 1, вакцинный штамм Сэбина получен из ГУ «НИИ полиомиелита и вирусных энцефалитов им. М. П. Чумакова РАМН». Титр вируса 6,5 lg ТЦИД50.
Аденовирус, тип 5, получен из Государственной коллекции вирусов «Института вирусологии им. Д. И. Ивановского» ФГБУ «НИЦЭМ им. Н. Ф. Гамалеи» Минздрава России. Титр вируса 6,0 lg ТЦИД50.
Вирус иммунодефицита человека 1 типа (ВИЧ-1). В качестве источника вируса иммунодефицита человека использовали штамм ВИЧ-1 899A, из коллекции штаммов вирусов иммунодефицита человека Государственной коллекции вирусов «Института вирусологии им. Д. И. Ивановского» ФГБУ «НИЦЭМ им. Н. Ф. Гамалеи» Минздрава России. Титр вируса 6,5 lg ТЦИД50.
Вирус гепатита С (ВГС). В качестве вируссодержащего материала использовали культуральную жидкость, собранную из инфицированных ВГС культур клеток почки эмбриона свиньи (СПЭВ) на стадии развития цитопатических явлений. Титр вируса 7,5 lg ТЦИД50.
Вирус гриппа А. В качестве источника вируса использовали штамм вируса гриппа человека А/H1N1 (Титр вируса 6,5 lg ТЦИД50, культура клеток почек собаки [MDCK]), из Государственной коллекции вирусов «Института вирусологии им. Д. И. Ивановского» ФГБУ «НИЦЭМ им Н. Ф. Гамалеи» Минздрава России.
Вирус герпеса простого (ВПГ). В качестве источника вируса простого герпеса тип 1, штамм Л2 (ВПГ-1), из Государственной коллекции вирусов «Института вирусологии им. Д. И. Ивановского» ФГБУ «НИЦЭМ им. Н. Ф. Гамалеи» Минздрава России. Титр вируса 4,5 lg ТЦИД50.
Клетки. В работе с вирусами использовали следующие перевиваемые культуры клеток: для вируса полиомиелита – клетки почки зеленых мартышек Vero, аденовируса – линию клеток человека HeLa, для ВИЧ – лимфобластоидные клетки человека МТ-4, для вируса гепатита С – культуру клеток почки эмбриона свиньи (СПЭВ), для вируса гриппа А человека – клетки почки собаки (MDCK). Для работы с вирусом простого герпеса использовали культуру клеток Vero и культуру диплоидных фибробластов человека М-19.
Структура исследования. Вирулицидный эффект испытуемых средств исследовали в суспензионном тесте (тест in vitro) и на различных тест-объектах, являющихся реальными объектами приложения средства или суррогатными аналогами. Основными способами обработки контаминированных вирусом тест-объектов были протирание, орошение и погружение. Суспензионный тест является исторически исходным тестом выявления вирулицидных свойств дезинфектанта и заключается в смешивании вируса с испытуемым средством в соотношении 1:9 (по отечественным нормативам) или 1:8 (в зарубежной практике) [3, 5].
